第38讲 微生物的培养技术和应用（专项训练）（四川专用）2026年高考生物一轮复习讲练测

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第38讲 微生物的培养技术和应用 目录 01 课标达标练 【题型一】微生物的基本培养技术 【题型二】微生物的选择培养与计数 02 能力突破练 (新考法+新情境) 03 高考溯源练 (含2025高考真题) 题型一 微生物的基本培养技术 1．结核分枝杆菌是引起结核病的主要病原菌，其生长缓慢，利用传统的培养方法往往需要数周甚至数月才能获得可见的菌落。我国科学家发明了一种能够快速培养结核分枝杆菌的培养基，该培养基中添加了缓冲体系溶液、结核菌素纯蛋白衍生物和牛血清纤维连接蛋白等物质。下列有关说法错误的是（    ） A．不能利用平板划线法对结核分枝杆菌进行分离计数 B．结核分枝杆菌的纯培养物是不含代谢废物的细菌培养物 C．牛血清纤维连接蛋白可为结核分枝杆菌的生长提供氮源 D．快速培养结核分枝杆菌的液体培养基可以用来扩大培养 【答案】B 【详解】A、平板划线法是通过接种环在培养基上连续划线，稀释菌液以获得单菌落，由于该方法无法确定蘸取菌液的量、稀释倍数等，故不能用于计数，A正确； B、由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。结核分枝杆菌的纯培养物是指仅含结核分枝杆菌的微生物群体，微生物生长会不断产生代谢废物，故培养物中必然含有代谢废物，B错误； C、牛血清纤维连接蛋白是蛋白质，含有氮元素，可为结核分枝杆菌生长提供氮源，C正确； D、液体培养基便于微生物与营养物质充分接触，有利于微生物大量增殖，可用于扩大培养结核分枝杆菌，D正确。 故选B。 2．在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（    ） A．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调节培养基的pH B．用稀释涂布平板法统计的微生物数量往往比实际值偏小 C．通过选择培养基培养出来的微生物群体一定是纯培养物 D．接种环和涂布器在接种前均需要灼烧，但两者的灼烧程度不同 【答案】C 【详解】A、不同微生物所需的最适pH不同，配制培养基时需根据目标微生物调节pH，如细菌常用中性或弱碱性，霉菌常用酸性，A正确； B、稀释涂布平板法统计时，若多个菌体连在一起形成单个菌落，会导致计数结果比实际活菌数少，故统计值偏小，B正确； C、选择培养基仅抑制非目标微生物生长，但若存在多种微生物适应选择条件（如耐高温或特定碳源利用），仍可能形成混合培养物，需进一步纯化，C错误； D、接种环需灼烧至红以灭菌（尤其首次划线前），而涂布器灼烧后需冷却避免烫死菌种，两者灼烧目的和程度不同，D正确。 故选C。 3．配制伊红-亚甲蓝琼脂培养基可用于鉴定大肠杆菌，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽。下图为检测大肠杆菌对某种抗生素的敏感性进行的实验，图示培养两天后所见结果(①②③为加有不同浓度抗生素的圆纸片)。下列相关叙述正确的是 A．接种用的方法是平板划线法 B．实验表明不同种的大肠杆菌对同一种抗生素敏感性不同 C．①②③周围透明圈的大小差异可能与培养基的氮源不同有关 D．浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照 【答案】D 【详解】A、该实验的接种方式是稀释涂布平板法，A错误； B、从图中看出，接种不同浓度抗生素的圆纸片周围的抑菌圈大小不同，说明同一种大肠杆菌对不同浓度抗生素的敏感度不同，B错误； C、本培养基的氮源是相同的，C错误； D、浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照，D正确。 故选D。 4．深海热泉沉积物中存在一种能分解几丁质的嗜热古菌。研究不同温度下，该古菌在以几丁质或乳糖为唯一碳源的培养基中的生长状况。其他条件保持一致且适宜，实验处理及结果如下表所示。下列说法正确的是（　　） 组别 温度 几丁质 乳糖 菌落 ① 常温（25℃） - + - ② 常温（25℃） + - - ③ 高温（95℃） - + - ④ 高温（95℃） + - + 注：”+”表示有；”-”表示无 A．接种前需对培养基和培养皿通过干热法进行灭菌 B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．由②④组可知，在以几丁质为唯一碳源的培养基上，该菌可在常温下生长 D．由③④组可知，高温下该菌不能在以乳糖为唯一碳源的培养基上生长 【答案】D 【详解】A、培养基灭菌应采用高压蒸汽灭菌法，而培养皿需用干热灭菌法。但接种前培养基已灭菌，培养皿在灭菌后无需再次灭菌，A错误； B、制备培养基的正确流程为：配制培养基→灭菌→倒平板。若先倒平板再灭菌，高温会破坏凝固的培养基结构，B错误； C、②组（常温+几丁质）无菌落，④组（高温+几丁质）有菌落，说明该菌生长需高温环境，常温下即使有适宜碳源也无法生长，C错误； D、③组（高温+乳糖）无菌落，④组（高温+几丁质）有菌落，表明高温下该菌只能分解几丁质，无法利用乳糖作为碳源，D正确。 故选D。 5．根腐病是一种真菌引起的疾病，该病会造成根部腐烂，吸收水分和养分的功能逐渐减弱，最后全株死亡，主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌，流程大致如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A．为防止杂菌污染，灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖，待冷却后倒置 B．倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性 C．高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100kPa、121℃，15～30min D．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 【答案】C 【详解】A、灭菌后的培养基需冷却至50℃左右再倒入培养皿，避免高温导致培养皿内壁产生冷凝水过多，A错误； B、真菌适宜在酸性环境中生长，而中性或弱碱性培养基常用于培养细菌，要分离真菌，需将pH调至酸性，B错误； C、高压蒸汽灭菌的标准条件为100kPa、121℃、灭菌15～30min，可有效杀灭包括芽孢在内的微生物，C正确； D、连续划线时，应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌种，获得单菌落，D错误。 故选C。 6．获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。在选择消毒和灭菌方法时，应根据实验的具体情况和需要，综合考虑各种因素，选择最适合的方法。同时，还应注意操作过程中的具体步骤问题。下列相关叙述错误的是（    ） A．微生物纯培养时，对培养基及培养用具需进行严格灭菌处理 B．在酒精灯火焰附近，不能将培养皿盖完全打开然后倒入培养基 C．玻璃器皿、金属用具可以干热灭菌，培养基一般进行湿热灭菌 D．经巴氏消毒法处理的食物因微生物被彻底消灭，可在常温下长期保存 【答案】D 【详解】A、微生物纯培养时，培养基需灭菌以防止杂菌干扰，培养用具（如培养皿、接种环）也需灭菌处理，A正确； B、倒平板时应在酒精灯火焰附近操作，仅打开培养皿盖一条缝隙倒入培养基，避免杂菌污染，B正确； C、玻璃器皿和金属用具耐高温且需保持干燥，适用干热灭菌；培养基含水分且需彻底灭菌，适用湿热灭菌（高压蒸汽灭菌），C正确； D、巴氏消毒法通过较低温度处理杀死部分微生物（尤其是致病菌），但未彻底消灭所有微生物（如芽孢），故处理后食物仍需低温保存，D错误。 故选D。 7．关于酵母菌的纯培养实验，下列说法正确的是（    ） A．把含有凝固培养基的培养皿倒过来放置的过程称为“倒平板” B．接种环在液体培养基中连续划线，将聚集的菌种逐步分散开来 C．在接种过程中，试管口、瓶口等部位可以通过灼烧来灭菌 D．经培养得到的单菌落一定是由单个酵母菌繁殖形成的纯培养物 【答案】C 【详解】A、“倒平板”分为四步：①拔出锥形瓶的棉塞；②将瓶口迅速通过火焰；③用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置，A错误； B、接种环在固体培养基中连续划线，将聚集的菌种逐步分散开来，B错误； C、在接种过程中，试管口、瓶口等部位可以通过灼烧来灭菌，C正确； D、经培养得到的单菌落有可能是由多个酵母菌繁殖形成，D错误。 故选C。 8．下列无菌技术相关叙述正确的是（    ） A．某些微生物能以无机物作为碳源，也能以无机物作为能源 B．消毒和灭菌都是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物 C．将要培养的微生物接种至培养基后，应立即放入高压蒸汽灭菌锅中 D．为保证超净工作台无菌，接种操作时应打开紫外灯 【答案】A 【详解】A、硝化细菌可以利用氨或铵盐作为合成有机物的能量，也可以以CO2为碳源，A正确； B、消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子)，B错误； C、培养基要先进行高压蒸汽灭菌再接种，C错误； D、 紫外线对人体有伤害，接种操作时不能打开紫外灯，D错误。 故选A。 9．菌种是一种极其宝贵的生物资源。菌种保藏是指通过适当方法使微生物能长期存活，并保持原种生物学特性稳定不变的一类措施。从细胞代谢的角度分析，菌种保藏的基本原理是（　　） A．限制菌种的新陈代谢 B．提升菌种的遗传特性 C．防止菌种受杂菌污染 D．促进菌株的生长繁殖 【答案】A 【详解】菌种保藏是指通过适当方法使微生物能长期存活，并保持原种生物学特性稳定不变的一类措施。菌种要长期存活，并保持原种生物学特性稳定不变，所以要求菌种在保藏时代谢活动比较弱，并保持活性，在条件适宜时能够大量繁殖，A正确，BCD错误。 故选A。 题型二 微生物的选择培养与计数 10．稀释倒平板法和稀释涂布平板法是分离和纯化微生物的常用方法。稀释倒平板法是先将待分离的菌液用无菌水作一系列的稀释，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倒入平板中，保温培养一段时间即可出现菌落。下列关于稀释倒平板法和稀释涂布平板法的叙述正确的是（　　） A．稀释倒平板法和稀释涂布平板法都需用涂布器将菌液涂布均匀 B．稀释倒平板法比稀释涂布平板法更便于观察微生物菌落的特征 C．热敏感型菌和好氧型菌的分离和纯化最好选择稀释涂布平板法 D．稀释涂布平板法的平板需倒置培养，稀释倒平板法的平板不用倒置培养 【答案】C 【详解】A、稀释倒平板法是将稀释后的菌液与熔化琼脂混合后倒入平板，无需涂布器操作，A错误； B、稀释倒平板法因琼脂与菌液混合不均匀，可能导致菌落分布不均，观察菌落特征不如稀释涂布平板法清晰，B错误； C、稀释涂布平板法通过涂布器均匀分布菌液，适合热敏感型菌(避免高温损伤)和好氧型菌(接触培养基表面利于氧气供应)，C正确； D、两种方法的平板均需倒置培养以防止冷凝水滴落，D错误。 故选C。 11．下列关于微生物培养、分离与计数的叙述，错误的是（    ） A．显微镜直接计数法测得的细菌数量通常大于稀释涂布平板法 B．将细菌原液稀释10倍后取0.1mL涂布一个平板得到100个菌落，则原液细菌浓度为1×10⁴个/mL C．涂布器灼烧的目的是灭菌，冷却的目的是避免高温杀死菌种 D．稀释涂布平板法接种微生物，待菌液被吸收后方可倒置培养 【答案】B 【详解】A、显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数，稀释涂布平板法可能存在多个活菌被当成一个菌落统计的情况，故计数结果前者大于后者，A正确； B、用稀释涂布平板法计数，通常选择3个菌落数目在30-300之间的平板取平均值进行计数，将细菌原液稀释10倍后取0.1mL涂布一个平板得到100个菌落，平板数目太少，计算结果不具有可靠性，B错误； C、涂布器灼烧的目的是灭菌（杀死涂布器上的微生物），冷却的目的是避免高温杀死菌种，C正确； D、稀释涂布平板法接种微生物，待菌液被吸收后方可倒置培养，D正确。 故选B。 12．农杆菌是植物基因工程中常用的一种细菌，下图是对培养的农杆菌进行菌落计数，图中的a、b、c、d中加入的都是LB培养基，经接种培养后，b、c、d中农杆菌的菌落数分别为48、57、60。下表为培养农杆菌的LB培养基配方。下列叙述错误的是（    ） 蛋白胨 10.0g 酵母粉 5.0g NaCl 10.0g 蒸馏水 1L A．a中农杆菌的密度约为5.5×10⁷个/mL B．蛋白胨和酵母粉都能为农杆菌提供碳源和氮源 C．LB培养基配制完成后，需将pH 调至弱酸性或中性 D．b、c、d都是固体培养基，可采用稀释涂布平板法接种 【答案】C 【详解】A、图中细菌稀释了106倍，若b、c、d中菌落数分别为48、57、60，则在a中农杆菌的密度约为（48+57+60）÷3÷1×106=5.5×107个/mL，A正确； B、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，该培养基中胰蛋白胨和酵母粉可以给农杆菌提供碳源和氮源，B正确； C、农杆菌是细菌，所以LB培养基配制完成后，需将pH 调至弱碱性或中性，C错误； D、b、c、d都是固体培养基，需要得到单菌落并且计数，可采用稀释涂布平板法接种，D正确。 故选C。 13．关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列说法错误的是（　　） A．取样时要选择表层土，取土样的铁铲和取样纸袋要进行灭菌处理 B．本实验中使用的平板较多，需要在各培养皿底上做好标记避免混淆 C．利用显微镜直接计数结果通常较稀释涂布平板法进行计数的结果偏高 D．若涂布0.2mL稀释103倍的培养液，获得菌落平均值为58，则每克土样中尿素分解菌数为2.9×105个 【答案】A 【详解】A、取样时一般要铲去表层土，取距地表3~8cm的土壤层，A错误； B、本实验中使用的平板较多，由于菌落是涂布在培养皿底部倒置培养，需要在各培养皿底上做好标记避免混淆，B正确； C、利用显微镜直接计数时活菌和死菌都会被统计，而稀释涂布平板法仅能统计活菌的数目，且多个菌可能共同形成一个菌落，因此前者的统计结果会比后者偏高，C正确； D、若取稀释103倍的0.2mL培养液进行涂布，获得菌落的平均值为58，根据公式C平均菌落数÷V涂布的体积数×M稀释倍数，可以计算出，58÷0.2×103=2.9×105个，即每克土样中尿素分解菌的数量为2.9×105个，D正确。 故选A。 14．尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成N2 B．振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中 C．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中所有菌的数目 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 【答案】B 【详解】A、分解尿素的细菌能合成脲酶，在脲酶的催化下能将尿素分解成NH3和二氧化碳，A错误； B、振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中，有利于后续的梯度稀释，B正确； C、稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目，但不能统计所有菌的数目，只能统计特定菌的数目，C错误； D、图中纯化培养得到的微生物未必都具有分解尿素的能力，如固氮菌也能在此培养基（以尿素为唯一氮源）中生长，因此还需要对得到的微生物进行鉴定，D错误。 故选B。 15．下列关于微生物的选择培养和计数方法，叙述错误的是（    ） A．菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度 B．不含氮源或碳源的培养基也能用于某些微生物的培养 C．能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长、繁殖的一定是尿素分解菌 D．用营养齐全的培养基在80℃条件下培养栖热菌属于选择培养 【答案】C 【详解】A、稀释涂布平板法中，稀释倍数过高会导致菌落数过少，过低则可能重叠，影响计数准确性，A正确； B、不含氮源的培养基可用于固氮微生物的培养，不含碳源的培养基可以用于自养型微生物的培养，B正确； C、以尿素为唯一氮源的培养基上生长出的可能是固氮菌，它可以利用空气中游离的N2作为氮源，C错误； D、用营养齐全的培养基在80℃下培养栖热菌属于选择培养，因为只有耐热的细菌才能在80℃下存活，D正确。 故选C。 16．科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如图，经步骤③最后一次稀释之后若在 3 个平板上分别接入 0.1 mL 稀释液，经适当培养后，得到的结果是 39、38、37。下列叙述正确的是（　　） A．步骤②振荡 20 min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 B．步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径与菌落直径比值较小的菌落培养 C．步骤⑤中的接种方法为平板划线法，3 次划线时需要对接种环灼烧 3 次 D．每克土样中的活菌数为 3.8×104个，该法统计的结果往往比实际值偏低 【答案】A 【详解】A、步骤②振荡 20 min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，减小实验误差，A正确； B、溶磷圈直径与菌落直径的比值较大，说明细菌分解磷酸盐的能力较强，所以应选择溶磷圈直径与菌落直径比值较大的菌落，B错误； C、采用步骤⑤中的平板划线法接种时，由于每次划线前后都要灼烧接种环，而图中共有 3 个划线区域，故接种环需要灼烧 4 次，C错误； D、步骤③进行了 3 次稀释，每次稀释了 10 倍，则共将土壤悬浮液稀释了 104 倍，（39 + 38 + 37）÷3÷0.1×104 = 3.8×106个/克；由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该数值与活菌的实际数目相比偏低，D错误。 故选A。 17．幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌，它能分解尿素，在菌体周围形成一层保护性“氨云”，中和胃酸，便于细菌定植致病。下列叙述不正确的有（    ） A．将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的培养基上进行“浓缩” B．若培养基中加入酚红指示剂，则菌落周围会出现红色环带，这与菌体内脲酶作用有关 C．幽门螺杆菌的DNA集中分布在拟核，利用宿主核糖体合成脲酶，且该过程中消耗水 D．在配制尿素培养基的过程中，无法使用高压蒸汽灭菌法灭菌，因为尿素加热易分解 【答案】C 【详解】A、以尿素为唯一氮源的培养基可以选择性培养幽门螺杆菌，通过富集培养实现“浓缩”，A正确； B、脲酶分解尿素产生氨，使培养基pH升高，酚红指示剂变红，菌落周围形成红色环带，B正确； C、幽门螺杆菌为原核生物，其DNA集中在拟核区，但合成脲酶依赖自身核糖体，而非宿主核糖体；且蛋白质合成是脱水缩合（生成水），而非消耗水，C错误； D、尿素高温易分解，需过滤除菌后加入已灭菌的培养基，无法使用高压蒸汽灭菌法，D正确。 故选C。 18．下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A组）和计数操作（B组）过程示意图。下列有关叙述错误的是（　　） A．④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂 B．⑨计数得到的细菌数与用显微镜直接计数法得到的细菌数相比较多 C．④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求 D．可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌 【答案】B 【详解】A、④和⑤所用培养基从物理性质分析，④是液体培养基，⑤是固体培养基，两者的区别是⑤中加有琼脂，A正确； B、⑨计数方法为稀释涂布平板法，只能统计活菌数，而显微镜直接计数法无论活菌还是死菌都统计在内，因此稀释涂布平板法统计得到的细菌数与用显微镜直接计数法得到的细菌数相比较少，B错误； C、该实验是为了分离得到纤维素分解菌，培养液中以纤维素作为唯一碳源时，只有能利用纤维素的微生物才能生长繁殖，从而筛选出纤维素分解菌，此外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求，C正确； D、当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，D正确。 故选B。 19．几丁质酶是一种能够将几丁质分解成几丁质单糖——N-乙酰葡萄糖胺（C8H15NO6）的酶。科研人员筛选出能高效降解几丁质的菌株，进而获得几丁质酶用于生产生活。下列叙述错误的是（    ） A．几丁质是一种含N元素的多糖，是一些真菌细胞壁的组成成分 B．制备培养基的过程中应该先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．可依据单菌落周围“几丁质水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 D．获得的几丁质酶可用于降解甲壳类动物的遗体，减少环境污染 【答案】B 【详解】A、几丁质由N-乙酰葡萄糖胺聚合而成，含N元素，且真菌细胞壁含几丁质，A正确； B、培养基制备应先灭菌再倒平板，若先倒平板后灭菌，灭菌时高温会导致培养基融化并污染，B错误； C、可依据单菌落周围“几丁质水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，比值越大，菌株分解几丁质能力越强，C正确； D、甲壳类动物遗体含几丁质外壳，用几丁质酶降解可促进物质循环，减少污染，D正确。 故选B。 20．塑化剂（DEHP，化学式为C24H38O4）被很多国家认定为毒性化学物质，其生物毒性机理：具有抗雄性激素、雌性激素活性，进而影响生物体的生殖功能。如图为某实验小组从土壤中筛选可降解DEHP细菌的过程。下列叙述正确的是（    ） A．图中固体培养基以DEHP为唯一碳源，图示均采用稀释涂布平板法进行接种 B．培养若干天后，应选择DEHP含量高的培养液进行接种以进一步扩增目的菌 C．覆盖过塑料薄膜的土壤样品中，DEHP降解菌的数量可能高于普通土壤 D．初选之前需对培养基、培养皿和覆盖过塑料薄膜的土壤样品均进行湿热灭菌 【答案】C 【详解】A、图中固体培养基以DEHP为唯一碳源，有利于降解DEHP的细菌的筛选；图中多次接种时没有体现稀释，所以所用接种方法不是稀释涂布平板法，A错误； B、培养若干天后，应选择培养瓶中DEHP含量低（说明被分解的多）的培养液接入新培养液中以扩增高效降解DEHP的菌株，B错误； C、据题可知，目的是从土壤中筛选可降解DEHP的细菌，由于覆盖过塑料薄膜的土壤中富含塑化剂，有利于降解DEHP的细菌生存，因此覆盖过塑料薄膜的土壤样品中，DEHP降解菌的数量可能高于普通土壤，C正确； D、初选之前固体培养基和摇瓶内的培养基需进行湿热灭菌、培养皿进行干热灭菌处理，以防杂菌污染，土壤不能灭菌，以免杀死所需微生物，D错误。 故选C。 1．在固氮酶的催化作用下，固氮菌能够将N2转化为NH3。固氮酶由铁蛋白（Fe蛋白）和钼铁蛋白（MoFe蛋白）结合而成，对氧气高度敏感，一旦遇氧很快就会丧失活性。下列说法错误的是（    ） A．固氮酶在固氮菌的核糖体上合成后还需进一步加工 B．氧气可能破坏了两种蛋白间的结合而使固氮酶失活 C．增强固氮菌的有氧呼吸酶活性有利于提高固氮作用 D．可以利用缺乏碳源和氮源的固体培养基筛选固氮菌 【答案】D 【详解】A、固氮酶由Fe蛋白和MoFe蛋白结合而成，两者均在核糖体合成。原核生物（如固氮菌）的蛋白质合成后通常无需内质网和高尔基体加工，但需正确折叠并与辅因子（如Fe、Mo）结合形成活性酶，此过程属于翻译后修饰，A正确； B、题干指出固氮酶遇氧失活，可推知，氧气可能破坏铁蛋白与钼铁蛋白的结构或结合，导致酶失活，B正确； C、需氧型固氮菌通过有氧呼吸消耗氧气，维持细胞内低氧环境以保护固氮酶，增强有氧呼吸酶活性可促进氧气消耗，有利于固氮作用，C正确； D、固氮菌为异养型，需外界提供碳源，在缺乏碳源的培养基中固氮菌无法生长，D错误。 故选D。 2．研究人员将结核分枝杆菌分别接种在含有不同浓度（单位：mg·mL-1）抗生素A与B的培养基中，在37℃的条件下培养24小时后，统计各培养基中的菌落数，结果如表所示。下列叙述正确的是（　　） 组别 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ V Ⅵ 抗生素A相对浓度 0 0.1 0.3 0.5 0.3 0.3 抗生素B相对浓度 0 0 0 0 0.3 0.5 菌落数 110 90 60 0 60 60 A．上述涉及的结核分枝杆菌的接种方法最可能是平板划线法 B．该实验的自变量为抗生素的种类 C．在一定范围内，抗生素A的杀菌能力与浓度呈正相关 D．抗生素B的杀菌能力大于抗生素A的 【答案】C 【详解】A、平板划线法用于菌种分离，而稀释涂布平板法更适用于菌落计数。本题需统计菌落数，故接种方法应为稀释涂布平板法，A错误； B、实验自变量包括抗生素种类和浓度（如组别Ⅰ-Ⅳ改变A浓度，Ⅴ-Ⅵ改变B浓度），而非单一变量，B错误； C、抗生素A浓度从0.1增至0.5 mg·mL-1时，菌落数从90降至0，说明杀菌能力与浓度呈正相关，C正确； D、组别Ⅲ（仅A 0.3）与Ⅴ、Ⅵ（A 0.3+B 0.3或0.5）菌落数均为60，表明抗生素B未增强杀菌效果，无法证明B杀菌能力更强，D错误。 故选C。 3．科研小组用双层平板法测定某污水样本中噬菌体的数量，操作流程是：①先铺 2%琼脂于培养皿底层，形成底层琼脂培养基；②将敏感指示菌和待测污水样本混合液，加入已熔化并降温至 45~48℃的 1%琼脂培养基中，迅速倾注于底层培养基上，形成上层培养基；③倒置培养一段时间后，计数噬菌斑。双层平板如下图所示。下列叙述正确的是（    ） A．与下层培养基相比，上层培养基中琼脂浓度低，形成的噬菌斑较大便于计数 B．可用酵母菌作为敏感指示菌对 T2 噬菌体进行计数 C．上层培养基冷却至 45~48℃，主要目的是防止底层培养基液化 D．倒平板前需对培养基和培养皿进行干热灭菌 【答案】A 【详解】A、由图注可知琼脂浓度越低越有利于噬菌体扩散，上层培养基中琼脂浓度较低，形成的噬菌斑较大便于计数，A正确； B、T2噬菌体专门寄生在大肠杆菌体内，酵母菌不是T2噬菌体的宿主，不能用酵母菌作为敏感指示菌对T2噬菌体进行计数，B错误； C、上层培养基冷却至45-48℃，主要目的是防止高温杀死敏感指示菌和噬菌体，C错误； D、对培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，而培养皿常用干热灭菌法，D错误。 故选A。 4．为探究青霉素对某种细菌的选择作用，将菌液涂布在培养基平板上，①放置不含青霉素的滤纸片，②③④放置含等量青霉素的滤纸片，培养结果如图。下列相关叙述错误的是（    ） A．培养基中应含有细菌生长所需的碳源、氮源等营养物质 B．盖上皿盖后，应将培养皿倒置并放在适宜温度下培养 C．培养过程中青霉素会诱导该细菌产生多种方向的变异 D．若从a处附近挑取细菌，重复上述操作，抑菌圈直径变小 【答案】C 【详解】A、培养基的基本成分包括碳源、氮源、水和无机盐等，这是细菌生长所必需的营养物质，所以培养基中应含有细菌生长所需的碳源、氮源等营养物质，A正确； B、盖上皿盖后，将培养皿倒置并放在适宜温度下培养，这样可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，B正确； C、变异是不定向的，在使用青霉素之前，细菌已经存在多种变异类型，青霉素只是对这些变异类型进行选择，而不是诱导细菌产生多种方向的变异，C错误； D、从a处附近挑取细菌，a处附近的细菌对青霉素的抗性较强，重复上述操作，经过多次选择，细菌的抗药性会增强，抑菌圈直径变小，D正确。 故选C。 5．某同学为验证转化因子的本质进行了系列实验，部分如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．步骤①中，利用了酶的专一性和自变量控制的“减法原理” B．步骤②中，加入甲或乙的量属于无关变量，应保持相等 C．步骤③中，用液体培养基可能比固体培养基更利于细菌转化 D．步骤④中，可在显微镜下观察菌落或细胞形态来检测实验结果 【答案】D 【详解】A、步骤①中，蛋白酶只能分解蛋白质，DNA酶只能分解DNA，利用了酶的专一性；同时分别用蛋白酶和DNA酶处理S型细菌的细胞提取物，是对自变量（处理提取物的酶种类）的控制，遵循了“减法原理”，A正确； B、步骤②中，加入的甲（经蛋白酶处理的提取物）或乙（经DNA酶处理的提取物）的量属于无关变量，无关变量应保持相等，这样才能保证实验的单一变量，B正确； C、液体培养基中细菌与转化因子接触更充分，比固体培养基更利于细菌转化，C正确； D、肉眼就可以观察到菌落，D错误。 故选D。 6．通过观察在固体培养基上因微生物生长或生化反应后出现的独特圈状结构，可实现目标微生物的分离与筛选。关于圈状结构与应用实例不相符的是（　　） A．抑菌圈——探究抗生素对细菌的选择作用 B．抑菌圈——评估某种待测药物的抗菌效能 C．透明圈——纤维素分解菌在含刚果红的鉴别培养基上生长 D．透明圈——尿素分解菌在含酚红指示剂的鉴别培养基上生长 【答案】D 【详解】A、抑菌圈是抗生素抑制细菌生长形成的无菌区域，通过观察抑菌圈大小可探究抗生素对细菌的选择作用（如耐药性菌株的筛选），A正确； B、抑菌圈的大小直接反映药物的抗菌能力，药物抗菌效能越强，抑菌圈越大，B正确； C、纤维素分解菌分泌纤维素酶分解培养基中的纤维素，刚果红与纤维素形成的红色复合物被分解后，菌落周围会出现透明圈，C正确； D、尿素分解菌分解尿素产生氨，使培养基pH升高，酚红指示剂遇碱变红，因此会形成红色环带而非透明圈，D错误。 故选D。 7．聚乙烯醇（PVA，一种难以降解的大分子有机物）能与碘作用产生蓝绿色复合物，复合物被降解后呈白色，PVA 分解菌能够产生 PVA 酶降解 PVA。某实验小组从土壤样品中分离具有降解 PVA 功能的菌株，大致过程是：①称量土样→②依次等比稀释→③涂布平板→④滴加碘液，挑取需要的单菌落转移至培养液中培养→⑤检测菌株降解 PVA 的能力→⑥选取优良菌株扩大培养。叙述正确的是（　　） A．制备以 PVA 为唯一碳源的培养基时应先灭菌再调 pH B．步骤③中涂布时需打开培养皿盖，以方便操作 C．步骤④中应挑取透明圈直径与菌落直径之比大的菌落进行培养 D．步骤⑥中若要准确计数某一时刻菌液中的活菌，应采用显微镜直接计数法 【答案】C 【详解】A、制备培养基时应先调节pH后灭菌，A错误； B、步骤③中涂布时需打开培养皿盖，但不能完全打开，还需要在火焰旁进行等，B错误； C、步骤④中，培养基中的PVA被可降解PVA的分解菌降解后，不能与碘作用产生蓝绿色复合物，出现透明圈，故透明圈直径与菌落直径之比越大说明菌株降解PVA的能力越强，C正确； D、显微镜直接计数不能区分菌体的死活，无法得到准确的活菌数目，D错误。 故选C。 8．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，某研究小组把该菌的悬浮液与不含任何特殊营养物质但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板，然后在平板上划分区域，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法不正确的是（    ） A．图示结果表明该菌需要特殊营养物质乙和丙 B．生长图形法还可用于某些菌种的筛选 C．倒平板后直接培养可用于判断有无杂菌污染 D．将所有平板放置在适宜的37℃下倒置培养并观察 【答案】D 【详解】A、分析题图可知，嗜热菌在添加了乙、丙生长因子的区域生长，故该菌需要的生长因子是乙和丙，A正确； B、不同的菌种所需的生长因子不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的生长因子区域生长，B正确； C、倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，C正确； D、为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，故本实验需要在较高的温度下进行而非37℃，D错误。 故选D。 9．下图是在氧气充足的条件下筛选某种营养缺陷型但高产酒精的酿酒酵母的示意图，已知营养缺陷型酵母只能在完全培养基上生长而不能在基本培养基上生长。原位影印是通过无菌绒布将原培养基上菌落保持位置不变接种到新培养基的过程。下列相关描述，正确的是（　　） A．紫外线处理的目的是对菌液进行消毒 B．图中①②③④均为完全培养基 C．图中B 过程的接种方法还可用于活菌计数 D．可以分别截取 D、E菌落周围的培养基进行酒精含量检测 【答案】C 【详解】A、紫外线处理的目的是提高酿酒酵母发生突变的频率，A错误； B、营养缺陷型酵母只能在完全培养基上生长而不能在基本培养基上生长，据此和题图呈现的信息可知，图中①②④为完全培养基，③为基本培养基，B错误； C、图中B 过程的接种方法为稀释涂布平板法，可用于活菌计数，C正确； D、由图可知：D在③（基本培养基）中无法生长，在④（完全培养基）中可生长，而E在③和④中均能生长，说明D是某种营养缺陷型酵母，但E不是，因此应截取 D菌落周围的培养基进行酒精含量检测，D错误。 故选C。 10．细菌P在与其他细菌的竞争中常常占据优势，推测与其产生的A蛋白和B蛋白有关，A蛋白为胞外蛋白。为探究其作用机理，科研人员以野生型菌和基因敲除菌为材料进行了相关实验：在固体培养基表面放置一张能隔离并吸附细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养48h后，将两张滤膜上菌体刮下计数，上层菌与下层菌数量的比值为竞争指数，结果如表。下列说法正确的是（　　） 　 甲组 乙组 丙组 丁组 上层菌 野生型菌 野生型菌 野生型菌 A基因敲除菌 下层菌 野生型菌 A-B双基因敲除菌 A基因敲除菌 A-B双基因敲除菌 竞争指数 1.4 3.8 1.3 1.4 A．采用稀释涂布平板法对刮下的菌体进行计数，待有菌落长出后即可进行计数 B．由甲组实验结果可推测细菌P为厌氧菌 C．通过乙、丁对比，可分析推理A蛋白对细菌的作用 D．推测B蛋白会增强A蛋白的毒性 【答案】C 【详解】A、稀释涂布平板法可以用于细菌计数，但需要菌落数量在30-300之间才能保证准确性，且需要培养至菌落稳定后才能计数，若菌落未完全形成会导致计数不准确，A错误； B、甲组上下层均为野生型菌，竞争指数1.4，可能与A、B蛋白的相互作用有关，而非厌氧特性，B错误； C、乙组（上层野生型，下层A-B双基因敲除菌）与丁组（上层A基因敲除菌，下层A-B双基因敲除菌）的对比中，唯一变量是上层菌是否含A蛋白。乙组竞争指数显著更高（3.8vs1.4），说明A蛋白增强了上层菌的竞争优势，C正确； D、乙组下层菌无A和B蛋白时竞争指数最高，而丙组下层菌仅无A蛋白（仍有B蛋白）时竞争指数较低（1.3），推测B蛋白可能帮助细菌抵抗A蛋白的毒性，而非增强其毒性，D错误。 故选C。 1．（2025·贵州·高考真题）金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子（单细胞后代）萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是（　　） A．可利用Ma开发成微生物杀虫剂 B．为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样 C．稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma D．接种培养Ma时使用的器具需消毒 【答案】D 【详解】A、金龟子绿僵菌（Ma）作为昆虫病原真菌，可通过寄生导致害虫死亡，符合微生物杀虫剂的特点，可用于生物防治，A正确； B、僵化死亡的昆虫体内含有大量Ma菌体，因此从研磨的僵虫组织取样是分离Ma的合理方法，B正确； C、稀释涂布平板法可通过梯度稀释和菌落形成来分离纯化微生物，适用于分离样品中的Ma，C正确； D、微生物培养中，接种环等直接接触菌种的器具需严格灭菌（如灼烧灭菌），而非仅消毒，消毒无法彻底杀灭微生物的芽孢或孢子，D错误。 故选D。 2．（2025·江苏·高考真题）从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（    ） A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 【答案】B 【详解】A、制备的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌，紫外线仅用于表面或空气消毒，无法灭菌，A错误； B、将土样加入无菌水制成悬液，经梯度稀释后，取各稀释度菌液涂布于培养基表面，分离并计数，B正确； C、连续划线时，每次应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌体，若从起始端开始无法有效分离单菌落，C错误； D、斜面培养基保存菌种需置于4℃短期保存，长期保存应使用甘油管藏法（-20℃），室温下无法长期保存，D错误。 故选B。 3．（2025·山东·高考真题）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A．可用平板划线法对该菌计数 B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 【答案】D 【详解】A、平板划线法是用来分离和纯化微生物，获得单个菌落的技术，其主要目的是分离而不是计数。用于活菌计数的方法通常是稀释涂布平板法，A错误； B、制备固体培养基（琼脂平板）的正确流程是：先将培养基成分溶解、调整pH值后，分装到三角瓶中，然后进行高压蒸汽灭菌。待培养基冷却至50℃左右时，再在无菌条件下（如超净工作台）倒入无菌的培养皿中（即“倒平板”），B错误； C、组②为常压 + 纤维素，结果无菌落，而组④为高压 + 纤维素，结果是有菌落。 这个对比恰好说明，在以纤维素为碳源的条件下，该菌不能在常压下生长，而能在高压下生长，C错误； D、③④组形成了一个对照实验，变量是碳源。实验结果表明，在高压条件下，该细菌可以利用纤维素生长（组④），但不能利用淀粉生长（组③），D正确。 故选D。 4．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（    ） 组别 培养条件 实验结果 ① 基础培养基 无法生长 ② 基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸 正常生长 ③ 基础培养基+甲、乙2种氨基酸 无法生长 ④ 基础培养基+甲、丙2种氨基酸 正常生长 ⑤ 基础培养基+乙、丙2种氨基酸 正常生长 A．组别①是②③④⑤的对照组 B．培养温度和时间属于无关变量 C．①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸 D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型 【答案】D 【详解】A、由表可知：除了组别①之外，其他组别的基础培养基中都添加了氨基酸，因此组别①是②③④⑤的对照组，A正确； B、由题意表中信息可知：实验的自变量为培养条件，各组别的培养温度和时间均相同，说明培养温度和时间均属于无关变量，B正确； C、由①②结果可知：粗糙脉孢霉突变株在基础培养基中无法生长，但在添加了甲、乙、丙3种氨基酸的基础培养基中能正常生长，这表明甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸，C正确； D、与组别①相比，在基础培养基中，若添加的氨基酸中含有丙种氨基酸，则粗糙脉孢霉突变株都能正常生长，但在只添加甲、乙2种氨基酸的基础培养基中无法生长，说明该突变株为氨基酸丙缺陷型，D错误。 故选D。 5．（2024·江苏·高考真题）酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（    ） A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 【答案】C 【详解】A、酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌和真菌，A错误； B、将含有酵母菌的培养基放置在28℃恒温培养箱中进行培养，B错误； C、稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，由此可知，可用稀释涂布平板法对酵母菌计数，C正确； D、酵母菌是真核细胞，具有高尔基体和内质网，可以对合成的蛋白质进行加工和修饰，D错误。 故选C。 6．（2025·广西·高考真题）利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是（　　） A．厨余垃圾分解过程产生的热量，会影响分解效率 B．对组成复杂的厨余垃圾再分类，可提高利用效率 C．厨余垃圾中的淀粉，可作为微生物的碳源和氮源 D．含盐量高的厨余垃圾，可选用耐高盐的微生物分解 【答案】C 【详解】A、微生物分解有机物时通过呼吸作用释放热量，若温度过高可能导致酶活性下降，从而影响分解效率，A正确； B、厨余垃圾成分复杂，分类后可根据不同成分选择适宜微生物或处理条件，提高分解效率，B正确； C、淀粉由C、H、O组成，仅含碳元素，可为微生物提供碳源，但无法提供氮源（氮源需含N元素），C错误； D、高盐环境会抑制普通微生物生长，但耐高盐微生物（如嗜盐菌）可适应此环境并分解有机物，D正确。 故选C。 7．（2025·四川·高考真题）微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量×100%），结果如下图。下列叙述正确的是（    ） A．用平板划线法能测定X菌组中的活菌数 B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 【答案】C 【详解】A、平板划线法主要用于微生物的分离和纯化，不能用于测定活菌数，测定活菌数常用稀释涂布平板法，A错误； B、Y菌组微塑料残留率较高，说明Y菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度高，微塑料残留率与菌对微塑料的降解能力有关，而非直接与菌浓度相关，B错误； C、由图可知，X+Y混合菌种组的微塑料残留率低于X菌组和Y菌组，说明混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种，C正确； D、该培养基中含有蛋白胨，能在该培养基中生长繁殖的微生物可能利用蛋白胨作为碳源和氮源等，但不一定都能降解微塑料，D错误。 故选C。 8．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（    ） A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 【答案】C 【详解】A、平板划线法无需稀释，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选C。 9．（2024·浙江·高考真题）脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（    ） A．镍是组成脲酶的重要元素 B．镍能提高尿素水解反应的活化能 C．产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖 D．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 【答案】B 【详解】A、根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组成脲酶的重要元素，A正确； B、脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B错误； C、产脲酶细菌可利用NH4Cl里的氮源进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖，C正确； D、产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，D正确。 故选B。 10．（2024·全国甲卷·高考真题）合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。回答下列问题。 (1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是 。 (2)该同学从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液，再从稀释菌液中取200 μL涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为 个/mL。 (3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是 ，冷却的目的是 。 (4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是 ，判断依据是 。（答出两点即可） (5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上的菌落呈 色。 【答案】(1)前者微生物分散的活菌和死菌一起计数，后者存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数活菌 (2)5000 (3)杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染 防止温度过高杀死菌种 (4)A A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高 (5)黑 【详解】（1）显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数。菌落计数法计数只计活菌数，还可能存在多个活菌形成一个菌落的情况，故前者的数量多于后者。 （2）从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液，即稀释了10倍，1mL细菌原液中细菌浓度=（菌落数÷菌液体积）×稀释倍数=（100÷0.2）×10个=5000个。 （3）菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染，冷却的目的是防止温度过高杀死菌种。 （4）A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高，因此A消毒液杀菌效果最好。 （5）大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈黑色。 学科网（北京）股份有限公司1 / 14 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 第38讲 微生物的培养技术和应用 目录 01 课标达标练 【题型一】微生物的基本培养技术 【题型二】微生物的选择培养与计数 02 能力突破练 (新考法+新情境) 03 高考溯源练 (含2025高考真题) 题型一 微生物的基本培养技术 1．结核分枝杆菌是引起结核病的主要病原菌，其生长缓慢，利用传统的培养方法往往需要数周甚至数月才能获得可见的菌落。我国科学家发明了一种能够快速培养结核分枝杆菌的培养基，该培养基中添加了缓冲体系溶液、结核菌素纯蛋白衍生物和牛血清纤维连接蛋白等物质。下列有关说法错误的是（    ） A．不能利用平板划线法对结核分枝杆菌进行分离计数 B．结核分枝杆菌的纯培养物是不含代谢废物的细菌培养物 C．牛血清纤维连接蛋白可为结核分枝杆菌的生长提供氮源 D．快速培养结核分枝杆菌的液体培养基可以用来扩大培养 2．在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（    ） A．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调节培养基的pH B．用稀释涂布平板法统计的微生物数量往往比实际值偏小 C．通过选择培养基培养出来的微生物群体一定是纯培养物 D．接种环和涂布器在接种前均需要灼烧，但两者的灼烧程度不同 3．配制伊红-亚甲蓝琼脂培养基可用于鉴定大肠杆菌，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽。下图为检测大肠杆菌对某种抗生素的敏感性进行的实验，图示培养两天后所见结果(①②③为加有不同浓度抗生素的圆纸片)。下列相关叙述正确的是 A．接种用的方法是平板划线法 B．实验表明不同种的大肠杆菌对同一种抗生素敏感性不同 C．①②③周围透明圈的大小差异可能与培养基的氮源不同有关 D．浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照 4．深海热泉沉积物中存在一种能分解几丁质的嗜热古菌。研究不同温度下，该古菌在以几丁质或乳糖为唯一碳源的培养基中的生长状况。其他条件保持一致且适宜，实验处理及结果如下表所示。下列说法正确的是（　　） 组别 温度 几丁质 乳糖 菌落 ① 常温（25℃） - + - ② 常温（25℃） + - - ③ 高温（95℃） - + - ④ 高温（95℃） + - + 注：”+”表示有；”-”表示无 A．接种前需对培养基和培养皿通过干热法进行灭菌 B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．由②④组可知，在以几丁质为唯一碳源的培养基上，该菌可在常温下生长 D．由③④组可知，高温下该菌不能在以乳糖为唯一碳源的培养基上生长 5．根腐病是一种真菌引起的疾病，该病会造成根部腐烂，吸收水分和养分的功能逐渐减弱，最后全株死亡，主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌，流程大致如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A．为防止杂菌污染，灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖，待冷却后倒置 B．倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性 C．高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100kPa、121℃，15～30min D．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 6．获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。在选择消毒和灭菌方法时，应根据实验的具体情况和需要，综合考虑各种因素，选择最适合的方法。同时，还应注意操作过程中的具体步骤问题。下列相关叙述错误的是（    ） A．微生物纯培养时，对培养基及培养用具需进行严格灭菌处理 B．在酒精灯火焰附近，不能将培养皿盖完全打开然后倒入培养基 C．玻璃器皿、金属用具可以干热灭菌，培养基一般进行湿热灭菌 D．经巴氏消毒法处理的食物因微生物被彻底消灭，可在常温下长期保存 7．关于酵母菌的纯培养实验，下列说法正确的是（    ） A．把含有凝固培养基的培养皿倒过来放置的过程称为“倒平板” B．接种环在液体培养基中连续划线，将聚集的菌种逐步分散开来 C．在接种过程中，试管口、瓶口等部位可以通过灼烧来灭菌 D．经培养得到的单菌落一定是由单个酵母菌繁殖形成的纯培养物 8．下列无菌技术相关叙述正确的是（    ） A．某些微生物能以无机物作为碳源，也能以无机物作为能源 B．消毒和灭菌都是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物 C．将要培养的微生物接种至培养基后，应立即放入高压蒸汽灭菌锅中 D．为保证超净工作台无菌，接种操作时应打开紫外灯 9．菌种是一种极其宝贵的生物资源。菌种保藏是指通过适当方法使微生物能长期存活，并保持原种生物学特性稳定不变的一类措施。从细胞代谢的角度分析，菌种保藏的基本原理是（　　） A．限制菌种的新陈代谢 B．提升菌种的遗传特性 C．防止菌种受杂菌污染 D．促进菌株的生长繁殖 题型二 微生物的选择培养与计数 10．稀释倒平板法和稀释涂布平板法是分离和纯化微生物的常用方法。稀释倒平板法是先将待分离的菌液用无菌水作一系列的稀释，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倒入平板中，保温培养一段时间即可出现菌落。下列关于稀释倒平板法和稀释涂布平板法的叙述正确的是（　　） A．稀释倒平板法和稀释涂布平板法都需用涂布器将菌液涂布均匀 B．稀释倒平板法比稀释涂布平板法更便于观察微生物菌落的特征 C．热敏感型菌和好氧型菌的分离和纯化最好选择稀释涂布平板法 D．稀释涂布平板法的平板需倒置培养，稀释倒平板法的平板不用倒置培养 11．下列关于微生物培养、分离与计数的叙述，错误的是（    ） A．显微镜直接计数法测得的细菌数量通常大于稀释涂布平板法 B．将细菌原液稀释10倍后取0.1mL涂布一个平板得到100个菌落，则原液细菌浓度为1×10⁴个/mL C．涂布器灼烧的目的是灭菌，冷却的目的是避免高温杀死菌种 D．稀释涂布平板法接种微生物，待菌液被吸收后方可倒置培养 12．农杆菌是植物基因工程中常用的一种细菌，下图是对培养的农杆菌进行菌落计数，图中的a、b、c、d中加入的都是LB培养基，经接种培养后，b、c、d中农杆菌的菌落数分别为48、57、60。下表为培养农杆菌的LB培养基配方。下列叙述错误的是（    ） 蛋白胨 10.0g 酵母粉 5.0g NaCl 10.0g 蒸馏水 1L A．a中农杆菌的密度约为5.5×10⁷个/mL B．蛋白胨和酵母粉都能为农杆菌提供碳源和氮源 C．LB培养基配制完成后，需将pH 调至弱酸性或中性 D．b、c、d都是固体培养基，可采用稀释涂布平板法接种 13．关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列说法错误的是（　　） A．取样时要选择表层土，取土样的铁铲和取样纸袋要进行灭菌处理 B．本实验中使用的平板较多，需要在各培养皿底上做好标记避免混淆 C．利用显微镜直接计数结果通常较稀释涂布平板法进行计数的结果偏高 D．若涂布0.2mL稀释103倍的培养液，获得菌落平均值为58，则每克土样中尿素分解菌数为2.9×105个 14．尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成N2 B．振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中 C．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中所有菌的数目 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 15．下列关于微生物的选择培养和计数方法，叙述错误的是（    ） A．菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度 B．不含氮源或碳源的培养基也能用于某些微生物的培养 C．能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长、繁殖的一定是尿素分解菌 D．用营养齐全的培养基在80℃条件下培养栖热菌属于选择培养 16．科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如图，经步骤③最后一次稀释之后若在 3 个平板上分别接入 0.1 mL 稀释液，经适当培养后，得到的结果是 39、38、37。下列叙述正确的是（　　） A．步骤②振荡 20 min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 B．步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径与菌落直径比值较小的菌落培养 C．步骤⑤中的接种方法为平板划线法，3 次划线时需要对接种环灼烧 3 次 D．每克土样中的活菌数为 3.8×104个，该法统计的结果往往比实际值偏低 17．幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌，它能分解尿素，在菌体周围形成一层保护性“氨云”，中和胃酸，便于细菌定植致病。下列叙述不正确的有（    ） A．将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的培养基上进行“浓缩” B．若培养基中加入酚红指示剂，则菌落周围会出现红色环带，这与菌体内脲酶作用有关 C．幽门螺杆菌的DNA集中分布在拟核，利用宿主核糖体合成脲酶，且该过程中消耗水 D．在配制尿素培养基的过程中，无法使用高压蒸汽灭菌法灭菌，因为尿素加热易分解 18．下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A组）和计数操作（B组）过程示意图。下列有关叙述错误的是（　　） A．④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂 B．⑨计数得到的细菌数与用显微镜直接计数法得到的细菌数相比较多 C．④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求 D．可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌 19．几丁质酶是一种能够将几丁质分解成几丁质单糖——N-乙酰葡萄糖胺（C8H15NO6）的酶。科研人员筛选出能高效降解几丁质的菌株，进而获得几丁质酶用于生产生活。下列叙述错误的是（    ） A．几丁质是一种含N元素的多糖，是一些真菌细胞壁的组成成分 B．制备培养基的过程中应该先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．可依据单菌落周围“几丁质水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 D．获得的几丁质酶可用于降解甲壳类动物的遗体，减少环境污染 20．塑化剂（DEHP，化学式为C24H38O4）被很多国家认定为毒性化学物质，其生物毒性机理：具有抗雄性激素、雌性激素活性，进而影响生物体的生殖功能。如图为某实验小组从土壤中筛选可降解DEHP细菌的过程。下列叙述正确的是（    ） A．图中固体培养基以DEHP为唯一碳源，图示均采用稀释涂布平板法进行接种 B．培养若干天后，应选择DEHP含量高的培养液进行接种以进一步扩增目的菌 C．覆盖过塑料薄膜的土壤样品中，DEHP降解菌的数量可能高于普通土壤 D．初选之前需对培养基、培养皿和覆盖过塑料薄膜的土壤样品均进行湿热灭菌 1．在固氮酶的催化作用下，固氮菌能够将N2转化为NH3。固氮酶由铁蛋白（Fe蛋白）和钼铁蛋白（MoFe蛋白）结合而成，对氧气高度敏感，一旦遇氧很快就会丧失活性。下列说法错误的是（    ） A．固氮酶在固氮菌的核糖体上合成后还需进一步加工 B．氧气可能破坏了两种蛋白间的结合而使固氮酶失活 C．增强固氮菌的有氧呼吸酶活性有利于提高固氮作用 D．可以利用缺乏碳源和氮源的固体培养基筛选固氮菌 2．研究人员将结核分枝杆菌分别接种在含有不同浓度（单位：mg·mL-1）抗生素A与B的培养基中，在37℃的条件下培养24小时后，统计各培养基中的菌落数，结果如表所示。下列叙述正确的是（　　） 组别 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ V Ⅵ 抗生素A相对浓度 0 0.1 0.3 0.5 0.3 0.3 抗生素B相对浓度 0 0 0 0 0.3 0.5 菌落数 110 90 60 0 60 60 A．上述涉及的结核分枝杆菌的接种方法最可能是平板划线法 B．该实验的自变量为抗生素的种类 C．在一定范围内，抗生素A的杀菌能力与浓度呈正相关 D．抗生素B的杀菌能力大于抗生素A的 3．科研小组用双层平板法测定某污水样本中噬菌体的数量，操作流程是：①先铺 2%琼脂于培养皿底层，形成底层琼脂培养基；②将敏感指示菌和待测污水样本混合液，加入已熔化并降温至 45~48℃的 1%琼脂培养基中，迅速倾注于底层培养基上，形成上层培养基；③倒置培养一段时间后，计数噬菌斑。双层平板如下图所示。下列叙述正确的是（    ） A．与下层培养基相比，上层培养基中琼脂浓度低，形成的噬菌斑较大便于计数 B．可用酵母菌作为敏感指示菌对 T2 噬菌体进行计数 C．上层培养基冷却至 45~48℃，主要目的是防止底层培养基液化 D．倒平板前需对培养基和培养皿进行干热灭菌 4．为探究青霉素对某种细菌的选择作用，将菌液涂布在培养基平板上，①放置不含青霉素的滤纸片，②③④放置含等量青霉素的滤纸片，培养结果如图。下列相关叙述错误的是（    ） A．培养基中应含有细菌生长所需的碳源、氮源等营养物质 B．盖上皿盖后，应将培养皿倒置并放在适宜温度下培养 C．培养过程中青霉素会诱导该细菌产生多种方向的变异 D．若从a处附近挑取细菌，重复上述操作，抑菌圈直径变小 5．某同学为验证转化因子的本质进行了系列实验，部分如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．步骤①中，利用了酶的专一性和自变量控制的“减法原理” B．步骤②中，加入甲或乙的量属于无关变量，应保持相等 C．步骤③中，用液体培养基可能比固体培养基更利于细菌转化 D．步骤④中，可在显微镜下观察菌落或细胞形态来检测实验结果 6．通过观察在固体培养基上因微生物生长或生化反应后出现的独特圈状结构，可实现目标微生物的分离与筛选。关于圈状结构与应用实例不相符的是（　　） A．抑菌圈——探究抗生素对细菌的选择作用 B．抑菌圈——评估某种待测药物的抗菌效能 C．透明圈——纤维素分解菌在含刚果红的鉴别培养基上生长 D．透明圈——尿素分解菌在含酚红指示剂的鉴别培养基上生长 7．聚乙烯醇（PVA，一种难以降解的大分子有机物）能与碘作用产生蓝绿色复合物，复合物被降解后呈白色，PVA 分解菌能够产生 PVA 酶降解 PVA。某实验小组从土壤样品中分离具有降解 PVA 功能的菌株，大致过程是：①称量土样→②依次等比稀释→③涂布平板→④滴加碘液，挑取需要的单菌落转移至培养液中培养→⑤检测菌株降解 PVA 的能力→⑥选取优良菌株扩大培养。叙述正确的是（　　） A．制备以 PVA 为唯一碳源的培养基时应先灭菌再调 pH B．步骤③中涂布时需打开培养皿盖，以方便操作 C．步骤④中应挑取透明圈直径与菌落直径之比大的菌落进行培养 D．步骤⑥中若要准确计数某一时刻菌液中的活菌，应采用显微镜直接计数法 8．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，某研究小组把该菌的悬浮液与不含任何特殊营养物质但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板，然后在平板上划分区域，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法不正确的是（    ） A．图示结果表明该菌需要特殊营养物质乙和丙 B．生长图形法还可用于某些菌种的筛选 C．倒平板后直接培养可用于判断有无杂菌污染 D．将所有平板放置在适宜的37℃下倒置培养并观察 9．下图是在氧气充足的条件下筛选某种营养缺陷型但高产酒精的酿酒酵母的示意图，已知营养缺陷型酵母只能在完全培养基上生长而不能在基本培养基上生长。原位影印是通过无菌绒布将原培养基上菌落保持位置不变接种到新培养基的过程。下列相关描述，正确的是（　　） A．紫外线处理的目的是对菌液进行消毒 B．图中①②③④均为完全培养基 C．图中B 过程的接种方法还可用于活菌计数 D．可以分别截取 D、E菌落周围的培养基进行酒精含量检测 10．细菌P在与其他细菌的竞争中常常占据优势，推测与其产生的A蛋白和B蛋白有关，A蛋白为胞外蛋白。为探究其作用机理，科研人员以野生型菌和基因敲除菌为材料进行了相关实验：在固体培养基表面放置一张能隔离并吸附细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养48h后，将两张滤膜上菌体刮下计数，上层菌与下层菌数量的比值为竞争指数，结果如表。下列说法正确的是（　　） 　 甲组 乙组 丙组 丁组 上层菌 野生型菌 野生型菌 野生型菌 A基因敲除菌 下层菌 野生型菌 A-B双基因敲除菌 A基因敲除菌 A-B双基因敲除菌 竞争指数 1.4 3.8 1.3 1.4 A．采用稀释涂布平板法对刮下的菌体进行计数，待有菌落长出后即可进行计数 B．由甲组实验结果可推测细菌P为厌氧菌 C．通过乙、丁对比，可分析推理A蛋白对细菌的作用 D．推测B蛋白会增强A蛋白的毒性 1．（2025·贵州·高考真题）金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子（单细胞后代）萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是（　　） A．可利用Ma开发成微生物杀虫剂 B．为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样 C．稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma D．接种培养Ma时使用的器具需消毒 2．（2025·江苏·高考真题）从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（    ） A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 3．（2025·山东·高考真题）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A．可用平板划线法对该菌计数 B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 4．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（    ） 组别 培养条件 实验结果 ① 基础培养基 无法生长 ② 基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸 正常生长 ③ 基础培养基+甲、乙2种氨基酸 无法生长 ④ 基础培养基+甲、丙2种氨基酸 正常生长 ⑤ 基础培养基+乙、丙2种氨基酸 正常生长 A．组别①是②③④⑤的对照组 B．培养温度和时间属于无关变量 C．①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸 D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型 5．（2024·江苏·高考真题）酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（    ） A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 6．（2025·广西·高考真题）利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是（　　） A．厨余垃圾分解过程产生的热量，会影响分解效率 B．对组成复杂的厨余垃圾再分类，可提高利用效率 C．厨余垃圾中的淀粉，可作为微生物的碳源和氮源 D．含盐量高的厨余垃圾，可选用耐高盐的微生物分解 7．（2025·四川·高考真题）微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量×100%），结果如下图。下列叙述正确的是（    ） A．用平板划线法能测定X菌组中的活菌数 B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 8．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（    ） A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 9．（2024·浙江·高考真题）脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（    ） A．镍是组成脲酶的重要元素 B．镍能提高尿素水解反应的活化能 C．产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖 D．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 10．（2024·全国甲卷·高考真题）合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。回答下列问题。 (1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是 。 (2)该同学从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液，再从稀释菌液中取200 μL涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为 个/mL。 (3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是 ，冷却的目的是 。 (4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是 ，判断依据是 。（答出两点即可） (5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上的菌落呈 色。 学科网（北京）股份有限公司1 / 14 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $