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课时跟踪检测(二) 微生物的基本培养技术
(标的题目为推荐讲评题目,配有精品课件。选择题请在后面答题栏内作答)
一、选择题
1.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中常加入琼脂这一理想的凝固剂,下列关于琼脂的说法,错误的是 ( )
A.不被所培养的微生物分解利用,对所培养的微生物无毒害作用
B.在大多数微生物生长温度范围内保持固体状态
C.琼脂凝固点低,有利于微生物的生长
D.琼脂在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强
2.下列关于培养基的配制的说法,错误的是 ( )
A.配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例
B.合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的
C.在培养细菌时,一般需要将培养基调至酸性
D.不同培养基的配方不同,但一般含有碳源、氮源、水和无机盐
3.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌锅、酒精、火焰灼烧、干热灭菌等几种不同的处理,这些方法依次用于杀死哪些部位的杂菌 ( )
A.接种环、手、培养基、涂布器
B.高压锅、手、接种环、培养基
C.培养基、手、接种环、吸管
D.接种环、手、高压锅、培养皿
4.采用平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上,下列有关平板划线操作的叙述,错误的是 ( )
A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B.第二次及以后每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种
C.第二次划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液
D.划线结束后,灼烧接种环,能及时杀死接种环上的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者
5.巴氏消毒法常用于酒、奶等的消毒,该消毒法能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法 ( )
A.一般不能杀灭芽孢等耐高温的细菌
B.能杀灭芽孢等休眠状态的细菌
C.能杀灭各种细菌,包括芽孢
D.能杀灭各种真菌,包括孢子
6.如图是利用平板划线法在培养基上获得微生物单菌落的实验操作,下列叙述错误的是 ( )
A.划线操作时,接种环只蘸取一次菌液
B.不能将第④区域的划线和第①区域的相连
C.观察菌落特征的最佳区域是①区域
D.在②~④区域划线前后均要灼烧接种环
7.大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,利用其代谢产物能与染料伊红—亚甲蓝反应,使菌落呈深紫色并带有金属光泽,从而将其鉴别出来。下表是其培养基配方。下列相关叙述错误的是 ( )
成分
蛋白胨
乳糖
磷酸二氢钾
X
蒸馏水
2%伊红
水溶液
0.5%亚甲蓝水溶液
含量
10 g
10 g
2 g
20~30 g
1 000 mL
20 mL
13 mL
A.培养基配方中X的成分可以是琼脂
B.该培养基中蛋白胨提供的主要营养有碳源、氮源和维生素等
C.可采用干热灭菌法对该培养基灭菌
D.可利用培养基上菌落的特征来判断和鉴别大肠杆菌的存在
8.如表中 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在 Ⅰ 中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在 Ⅱ 中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是 ( )
序号
粉状硫
10 g
K2HPO44 g
FeSO4
0.5 g
蔗糖
10 g
(NH4)2SO4
0.4 g
H2O
100 mL
MgSO4
9.25 g
CaCl2
0.5 g
Ⅰ
+
+
+
+
-
+
+
+
Ⅱ
+
+
+
-
+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
注:“+”表示含有该物质,“-”表示不含有该物质。
A.甲、乙、丙都是异养型微生物
B.甲、乙都是自养型微生物、丙是异养型微生物
C.甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物
D.甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物
9.[多选]生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,某研究小组把该菌的悬浮液与不含任何特殊营养物质但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示。下列说法正确的是 ( )
A.倒平板后直接培养可判断有无污染
B.将所有平板放置在适宜的37 ℃下倒置培养并观察
C.图示结果表明该菌需要特殊营养物质乙和丙
D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选
二、非选择题
10.鲸死亡后会沉入海底,俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食,同时产生硫化氢等一些硫化物。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐,并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题:
(1)培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源,培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是 。要培养硫细菌,培养基中的成分需要特殊配制,主要体现在
,这种培养基可以用来专一性培养硫细菌。
(2)在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基,在倒平板操作后,将平板倒置,这样做的目的是________
_________________________________________________________________________________________。
(3)若想得到“鲸落”中某目标菌种,可用平板划线法进行纯化。若下图甲是接种培养后的菌落分布图,对应的平板划线操作示意图为 。图甲中的③更易获得单菌落,判断依据是_________________________
_________________________________________________________________________________________。
11.扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一,其代谢产物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布,研究人员进行了如图所示的实验,其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处,取样分离的5 个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题:
(1)苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外,还有枯草杆菌。两种微生物在结构上的主要区别是 。
(2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表,根据物理性质划分该培养基属于 培养基,其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是 ;NaNO3的作用是
(答两点)。
蔗糖
NaNO3
MgSO4
KCl
FeSO4
KH2PO4
蒸馏水
30 g
2 g
0.5 g
0.5 g
0.01 g
1 g
1 000 mL
(3)用平板划线法分离扩展青霉时,划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是___________________________________________
____________________________________。
(4)接种扩展青霉前,应对苹果进行 (填“消毒”或“灭菌”)。研究人员测定了病斑直径为1 cm、2 cm、3 cm 的苹果中①~⑤号部位的Pat含量,请推测最可能的结果: ;
__________________________________________________________________________________________。
课时跟踪检测(二)
1.选C 琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用,在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强,A、D正确;琼脂在水中加热至98 ℃时开始熔化,温度降至44 ℃时才开始凝固,大多数微生物生长最适宜的温度范围为16~30 ℃,所以琼脂在大多数微生物生长温度范围内保持固体状态,B正确;琼脂的凝固点相对于微生物生长的温度较高,凝固剂的凝固点不能太低,否则不利于微生物的生长,C错误。
2.选C 在培养细菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性。
3.选C 高压蒸汽灭菌锅是湿热灭菌的设备,通常用于培养基的灭菌;用酒精擦拭双手是消毒的一种方法;火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具;干热灭菌一般适用于玻璃器皿的灭菌,如吸管。
4.选C 在平板划线操作中,用接种环蘸取菌液前的第一步灼烧,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,A正确;第二次及以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,B正确;从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,C错误;划线结束后,仍需灼烧接种环,其目的是能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者,D正确。
5.选A 巴氏消毒法可以杀死绝大多数微生物,但一般不能杀灭芽孢等耐高温细菌。
6.选C ①区域是划线开始的区域,此区域接种微生物较多,不易出现单菌落,④区域最易出现单菌落,是观察菌落特征的最佳区域。
7.选C 鉴别培养基将大肠杆菌鉴别出来,需要使用固体培养基,则培养基配方中X的成分可以是琼脂,A正确;该培养基中,蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有碳源、氮源和维生素等,B正确;培养基灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法,C错误;除利用特定培养基选择、鉴定某种细菌外,还可以依据菌落的形状、大小等特征对细菌进行初步的鉴定和分类,D正确。
8.选C 根据表格分析,甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能,而Ⅰ培养基缺氮,说明甲属于固氮微生物;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,而甲和丙都不能,Ⅱ培养基中没有有机碳源,说明乙属于自养型微生物;丙不能在Ⅰ培养基中生长,说明不能固氮,又不能在Ⅱ培养基中生长,说明不能合成有机物,只能在Ⅲ培养基中生长,说明丙属于异养型微生物,C正确。
9.选ACD 倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现,可以判断培养基有无污染,A正确;该菌为嗜热菌,应放置在其适宜的高温条件下培养,而不是37 ℃,B错误;图中嗜热菌在添加了乙、丙特殊营养物质的交界区域生长,故该菌需要的特殊营养物质是乙和丙,C正确;菌种只会在提供其需要的生长因子的区域生长,不同的菌种所需的特殊营养物质不同,利用生长图形法可用于某些菌种的筛选,D正确。
10.解析:厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食,属于异养型微生物,故培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是含碳有机物(或脂肪)。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐,并以该过程中释放的能量合成有机物,即硫细菌为自养型微生物,所以要培养硫细菌,培养基中的成分需要特殊配制,主要体现在碳源必须是含碳无机物(或碳酸盐),同时加入硫化物。
答案:(1)含碳有机物(或脂肪) 碳源必须是含碳无机物(或碳酸盐),同时加入硫化物 (2)防止培养皿皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染;防止培养基中的水分过快蒸发 (3)丙 自第二次划线开始,每次划线的菌种都来自上一次划线的末端,最后一次划线结束时更容易获得单菌落
11.解析:(2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分中没有凝固剂,故根据物理性质划分该培养基属于液体培养基。
(3)若划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落,可能是因为第一区域划线结束,接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始。
(4)接种扩展青霉前,为了避免苹果上其他杂菌、病原微生物的污染,应对苹果进行消毒处理。由图可知,①号为腐烂部位,②③④⑤依次距离腐烂部位越来越远,推测相同病斑直径情况下,①号部位的Pat含量最高,离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低,相同部位病斑越大,Pat含量越高。
答案:(1)扩展青霉有以核膜为界限的细胞核,枯草杆菌无 (2)液体 蔗糖 为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐;维持培养液一定的渗透压 (3)第一区域划线结束,接种环灼烧后未冷却(或划线未从第一区域末端开始) (4)消毒 相同病斑直径情况下,离病斑越远的部位,Pat含量越低 相同部位病斑越大,Pat含量越高
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